石蜡包埋及注意事项

 包埋，顾名思义，将样本用石蜡包裹起来，样本埋在石蜡里面。为什么要进行包埋？

 组织块一般都是柔软的，或者软硬不均，很难被切成片，何况是厚度在3-5um的薄片。因此，必须有某种物质浸入到组织块内部起支撑作用，并且将组织块包住固定，才能获得良好的切片效果，而用到的这种物质就是包埋剂，整个过程称之为包埋。包埋剂有很多种，常用的包埋剂有石蜡，明胶，碳蜡，OCT ，火棉胶，塑料等。不同的包埋剂发挥着不同的作用，可以根据实验目的需要选择。

我们最常见的是用石蜡包埋，石蜡分软蜡和硬蜡，熔点在40度以下的称软蜡，熔点在40度以上的称硬蜡，包埋发生在组织固定脱水透明之后，先要浸蜡，需要从低温到高温，从软蜡到硬蜡。浸蜡温度不宜过高，会使组织发硬，还会导致组织内的抗原受到破坏。浸蜡的过程不能省，浸蜡不彻底直接影响后续切片的质量。样本浸蜡之后，再经过两次干净的纯硬蜡，然后将样本与熔化的石蜡一起放入包埋盒中，包埋盒的内面应平滑、清洁，包埋动作要迅速，防止蜡凝固，填充液态石蜡的时候，避免填充不足，这可能导致切片机夹持不稳定，从而导致切片厚薄不均，填充过满会影响蜡块切面正确对齐。所以填充液态蜡是非常重要的一步，包埋不细致可能导致切片更困难。

包埋时要注意选定组织块的切面，实质性组织取最大面积做切面（特殊情况特殊对待），管腔组织一般选横断面，皮肤等囊皮组织应立埋。包埋时用的镊子不可加温过高，以免烫伤组织。用加热的镊子迅速将样本按所需的切面摆放整齐并固定住，并赶走周围的气泡。待表面的石蜡凝固住，将整个包埋盒放上冷冻台，使石蜡迅速凝固，最后从包埋盒中取出石蜡块以便保存。

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